Verfolgung frei laufender Fliegen: Eine Methode zur Beurteilung der Fortbewegung bei Drosophila

- Verwenden Sie eine überdachte Arena - zum Beispiel eine Petrischale, die mit klarem Silikon gefüllt ist -, um sicherzustellen, dass Fliegen frei laufen können, aber nicht in der Arena fliegen können, wenn sie abgedeckt ist. Stellen Sie die Schüssel auf eine weiß beleuchtete Fläche und positionieren Sie eine Kamera direkt darüber.

Übertragen Sie bei geöffnetem Deckel betäubte Fliegen in die Schale, decken Sie sie ab und lassen Sie die Probanden sich erholen. Die Fliegen bewegen sich während der Prüfung frei in der Arena. Um die Fortbewegung zu bewerten, verfolgen Sie die Position jeder Fliege im Zeitverlauf, und berechnen Sie Parameter, die die Fortbewegung charakterisieren, z. B. die von jeder Fliege zurückgelegte Strecke. In diesem Beispielprotokoll sehen wir eine Demonstration der Assay-Einrichtung und -Analyse mit Hilfe von Video-Tracking-Software.

- Um die Bewegungen der Fliegen in einer Petrischale zu verfolgen, füllen Sie zunächst eine 6 Zentimeter lange Schale mit transparentem Silikonelastomer, um die Fährtensucharena herzustellen. Lassen Sie zwischen Silikon und Deckel einen Abstand von 3 Millimetern, damit Fliegen frei in dem Spalt laufen, aber nicht fliegen können. Unt