0 Aufrufe • 2:59 Min. • April 30th, 2023
- In einem Röhrchen mit M9-Puffer werden bis zu 150 Hermaphroditenwürmer im gewünschten Entwicklungsstadium gesammelt. Entfernen Sie Bakterien von den Würmern, indem Sie sie mit M9-Puffer waschen und zentrifugieren.
Betrachten Sie das Röhrchen unter einem Präpariermikroskop, wenn Sie den Überstand entfernen, um Probenverluste zu vermeiden. Übertragen Sie die Würmer in eine Glasschale mit einem minimalen Volumen M9-Puffer. Fügen Sie Levamisol hinzu, um die Würmer zu betäuben.
Lokalisiere den Kopf des Wurms und den Rachen oder Vorderdarm, der zwei zwiebelförmige Strukturen enthält. Mit zwei Nadeln habe ich den Wurm hinter dem Rachen durchtrennt. Stellen Sie sicher, dass Sie die Dissektion schnell abschließen, um eine Beeinträchtigung des Gewebes zu vermeiden.
Sobald die Kutikula aufgebrochen ist, werden die beiden Keimdrüsenarme durch den Innendruck des Wurms extrudiert oder aus dem Körper herausgedrückt.
In diesem Beispiel werden wir Gonaden von adulten Würmern für die Immunfluoreszenzanalyse präparieren.
- Entnehmen Sie 100 bis 150 Würmer im gewünschten Entwicklungsstadium und sammeln Sie sie in einem 1,5-Milliliter-Mikrozentrifugenröhrchen mit 100 Mikrolitern M9-Puffer. Füllen Sie
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