Schwimminduzierter Lähmungsassay (SWIP): Eine Methode zur Quantifizierung der Dopamin-vermittelten Fortbewegung bei C. elegans

0 Aufrufe • 3:50 Min. • April 30th, 2023

- Um den schwimminduzierten Lähmungstest (SWIP-Assay) durchzuführen, übertragen Sie L4-Larven von C. elegans auf eine mit Flüssigkeit gefüllte Glasspotplatte. Identifizieren Sie L4-Hermaphroditen anhand des Vorhandenseins der sich entwickelnden Vulva. Ein halbmondförmiger Fleck in der Körpermitte und ein peitschenartiger Schwanz.

Um das Dopamin-vermittelte Schwimmen zu beurteilen, zeichnen Sie die Bewegung des Wurms auf, die durch C-förmiges Körperbeuge- und Dreschverhalten gekennzeichnet ist. Normalerweise setzen dopaminerge Neuronen Dopamin in den synaptischen Spalt frei, der wiederum Dopaminrezeptoren auf der Empfängerzelle bindet.

Sobald die Nachricht weitergegeben wird, wird Dopamin von den Rezeptoren freigesetzt, und ungebundene Neurotransmitter können vom dopaminergen Neuron über spezialisierte Transporterproteine aufgenommen und wiederverwendet werden.

Bei Larven mit veränderter Dopamin-Signalübertragung, die durch inaktivierende Mutationen im Dopamintransporter oder medikamentöse Behandlungen verursacht werden, die die Dopaminfreisetzung erhöhen, reichert sich Dopamin im synaptischen Spalt an. Überschüssiges Dopamin stimuliert die Dopaminrezeptoren, stört das motorische Pr

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