Mikroinjektion von lebenden Drosophila-Embryonen: Frühzeitige Abgabe von Reagenzien an den sich entwickelnden Embryo

- Sammeln Sie lebende Drosophila-Embryonen und entfernen Sie ihre undurchsichtigen Chorionen. Tragen Sie dann auf ein Glasdeckglas eine Linie Heptankleber auf, bei dem es sich um Klebeband handelt, der in flüssigem Heptan gelöst ist. Um mit den nun dechorionierten Embryonen umgehen zu können, richten Sie die Proben vorsichtig in einer Reihe auf dem Klebstoff aus.

Übertragen Sie das Deckglas in eine Dehydrationskammer, um die Embryonen teilweise auszutrocknen. Dadurch wird ein zytoplasmatisches Austreten während oder nach der Injektion verhindert. Entfernen Sie anschließend das Deckglas und bedecken Sie die Embryonen mit Halogenkohlenwasserstofföl, um eine weitere Dehydrierung zu verhindern, während der Sauerstoff weiterhin in die Embryonen diffundieren kann.

Um die Mikroinjektion durchzuführen, verwenden Sie ein Mikroinjektionssystem an einem kompatiblen Mikroskop. Indem Sie durch die Augenteile schauen, identifizieren Sie sowohl die Embryonen als auch die mit der Injektionslösung vorgeladene Nadel. Brechen Sie die Nadel auf und stellen Sie sicher, dass sie gleichmäßige und richtig große Flüssigkeitstropfen produziert. Führen Sie dann die Nadel in den Embryo ein und injizieren Sie