Light Spot Assay: Eine Methode zur Untersuchung des phototaktischen Verhaltens von Drosophila

- Beginnen Sie damit, eine dritte Larve, die größte der Larvenformen, aus dem Nährmedium auszuwählen und sie mit Wasser zu waschen, um jegliche Nahrung zu entfernen. Da sich die Larvenaugen oder Bolwig-Organe an der oberen Vorderseite der Larve befinden, platzieren Sie die Larve in der Mitte einer Agarplatte, wobei die Lichtquelle über dem Tier liegt. Schalten Sie das Raumlicht aus und lassen Sie die Larve sich an die Dunkelheit gewöhnen.

Da die Larve in einem Lichtfleck durch sichtbares Licht kaum zu erkennen ist, schalten Sie Infrarot-LED-Leuchten ein, um das Tier für die Kamera zu beleuchten. Warte, bis das Tier anfängt, geradeaus zu kriechen, um seinen Weg zu kontrollieren. Und dann drehen Sie die Platte so, dass die Larve direkt auf den Lichtfleck zukriecht. Nehmen Sie auf, wie das Tier ins Licht kriecht und dann vom Lichtfleck weg ist. Diese Taktik der Lichtvermeidung hilft den Larven, Fressfeinden auszuweichen, indem sie sich in die Nahrung eingraben.

Im folgenden Beispiel werden wir den Lichtflecken-Assay durchführen, um die Fähigkeit verschiedener genetischer Stämme von Drosophila-Larven zu testen, dem Licht zu entkommen.

- Bevor Sie die Larve in die Bildgebung einführen,