0 Aufrufe • 2:26 Min. • April 30th, 2023
- Um die durchschnittliche Lebensdauer einer Nematodenpopulation zu messen, beginnen Sie mit entwicklungssynchronisierten L1-Larven in M9-Puffer. Bestimmen Sie die Dichte der Larven und geben Sie dann 50 auf jede Platte. Bereiten Sie mindestens drei Replikationsplatten pro Bedingung sowie Backup-Platten vor.
Lassen Sie diese Würmer sich normal entwickeln, bis sie das L4-Stadium erreichen. Jetzt kannst du FUdR auf die Platten geben, was verhindert, dass die Würmer Nachkommen produzieren. Alternativ müssen Sie die Würmer jeden Tag nach der Zählung auf neue Platten setzen, um sicherzustellen, dass Sie nur die Lebensdauer einer einzigen Generation messen.
Entfernen Sie als Nächstes alle Männchen. Dadurch werden die Variablen Geschlecht und Paarung aus dem Experiment entfernt. Zähle am nächsten Tag die Anzahl der lebenden Würmer auf dem Teller, indem du nach spontanen Bewegungen oder Reaktionen auf sanfte Berührungen Ausschau hältst. Entfernen Sie alle toten Würmer und notieren Sie die Zahlen. Zählen Sie täglich die überlebenden Würmer, bis keine mehr übrig sind. Im Beispielprotokoll sehen wir eine Demonstration eines Lebensdauer-Assays.
- Beladen Sie die vorbereiteten, mit Bakterien be
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