Epidermale Laserverletzung: Induktion lokalisierter Schädigung zur Untersuchung von Reparaturprozessen bei C. elegans

0 Aufrufe • 3:21 Min. • April 30th, 2023

- Übertragen Sie zunächst junge erwachsene Würmer auf ein frisches Agarose-Pad auf einer Folie. Fügen Sie dann ein paar Tropfen 12 millimolare Levamisollösung hinzu, um die Würmer zu lähmen. Decken Sie die Würmer mit einem Deckglas ab und warten Sie einige Minuten. Legen Sie den Objektträger unter ein konfokales Mikroskop mit rotierender Scheibe und fokussieren Sie auf die seitliche äußerste Oberfläche des Wurms.

Die Epidermis eines adulten Wurms ist eine dünne, einschichtige Struktur, die aus mehrkernigen Synzytien besteht, die aus Zellfusionsereignissen resultieren. Die apikale Oberfläche der Epidermis sezerniert eine flexible kollagene Kutikula, während die Basaloberfläche von einer dünnen Schicht extrazellulärer Matrix bedeckt ist, die als basale Lamina bezeichnet wird.

Als nächstes wickeln Sie die apikale Oberfläche der Epidermis mit einem Laser auf. Zytoplasma aus den geschädigten Zellen kann austreten und als Blase an der Wundstelle erscheinen.

Die Laserbestrahlung hat einen Vorteil gegenüber anderen Techniken, wie z. B. der Nadelverletzung, da sie eine lokale Störung der Kutikula und der Epidermiszellen verursacht, ohne das innere Gewebe zu schädigen. Im Beispielprotokoll s

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