JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Krebsforschung
0 Aufrufe • 3:22 Min. • April 30th, 2023
- Zu Beginn säen Sie die menschlichen Leukämiezellen in einem frisch vorbereiteten Nährmedium aus und inkubieren Sie sie für den gewünschten Zeitraum. Nach der Inkubation färben Sie eine kleine Menge dieser Zellsuspension mit Trypanblau und beurteilen Sie die Zellviabilität mit einem TC20-Zellzähler. Tote Zellen sind durchlässig und nehmen den negativ geladenen Farbstoff auf, während lebensfähige Zellen undurchlässig sind.
Als nächstes fügen Sie dem Kulturkolben Methyl-Beta-Cyclodextrin hinzu, um das Cholesterin der Zelle ausreichend zu erschöpfen und sie anfällig für Ultraschall zu machen. Inkubieren Sie die Zellen für den gewünschten Zeitraum. Füllen Sie das Zellbeschallungssystem mit deionisiertem Wasser und entgasen Sie es einige Minuten lang, um Vakuumblasen zu vermeiden. Übertragen Sie die gewünschte Menge an Zellen in das Szintillationsfläschchen und befestigen Sie das Fläschchen an der Haltevorrichtung des Zellbeschallungssystems.
Setzen Sie die Haltevorrichtung auf das Horn und stellen Sie die gewünschte Höhe von der Spitze des Horns ein. Stellen Sie die erforderlichen Impulse für die gewünschte Dauer ein, um die Zellen zu beschallen. Geben Sie Trypanblau in die Zellsuspen
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos