2D-Co-Kultur von leukämischen Zellen mit BMSCs: Eine Methode zur Gewinnung von Subpopulationen leukämischer Zellen

- In einem 2D-Co-Kultursystem werden mehrere Zelltypen in flachen Kulturplatten zusammen gezüchtet. Dieses Kultursystem ermöglicht die Untersuchung von Zellinteraktionen und -verhalten in vitro. Um eine leukämische Zell-Co-Kultur mit Knochenmark-Stromazellen (BMSCs) zu etablieren, fügen Sie einer adhärenten Monolayer-Kultur von BMSCs eine leukämische Zellsuspension hinzu und inkubieren Sie die Platte unter geeigneten Kulturbedingungen. Behalten Sie die Co-Kultur bei, indem Sie jeden vierten Tag 90 % des Nährmediums austauschen.

Während dieser 2D-Co-Kultur interagieren die leukämischen Zellen mit den BMSCs und lokalisieren sich in unterschiedlichen Regionen der Kultur, wodurch drei Subpopulationen gebildet werden. Die Phasenkontrastmikroskopie ermöglicht die visuelle Unterscheidung der drei Subpopulationen. Die erste Gruppe von Leukämiezellen, die frei im Medium zu schweben scheint, wird als suspendierte Zellen kategorisiert. Die zweite Gruppe von Leukämiezellen, die an der Oberfläche der BMSC-Monoschicht haften, erscheint hell und wird als phasenhelle Zellen kategorisiert.

Die dritte Gruppe von Leukämiezellen, die unter die Monoschicht gewandert sind, erscheint dunkel und wird als