JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Krebsforschung
0 Aufrufe • 4:39 Min. • April 30th, 2023
- Der extrazelluläre Fluss-Assay hilft bei der Untersuchung des Zellstoffwechsels, indem er die beiden Hauptenergiewege misst - Glykolyse und mitochondriale Atmung. Während der Glykolyse verstoffwechseln die Zellen Glukose und sezernieren Laktat zusammen mit Protonen in den extrazellulären Raum, bestimmt durch Messung der extrazellulären Ansäuerungsrate oder ECAR. Während der mitochondrialen Atmung verwenden Zellen Sauerstoff für die ATP-Produktion, gemessen durch Bestimmung der Sauerstoffverbrauchsrate oder OCR.
Krebszellen weisen eine hohe Glukoseaufnahme auf, da sie ihre Stoffwechselrate ändern, um sich anzupassen und eine unregulierte Zellproliferation aufrechtzuerhalten. Um den Stoffwechsel in Krebszellen zu analysieren, bauen Sie zunächst eine Mikroplatte für die Flussanalyse zusammen, die eine adhärente Monoschicht der Krebszellen und eine hydratisierte Sensorkartusche enthält. Übertragen Sie die Plattenbaugruppe in einen Flussmittelanalysator. Innerhalb des Analysators senken sich die Sensorsonden ab, um eine transiente Mikrokammer zu erzeugen. Um den extrazellulären Fluss zu messen, führt der Injektionsanschluss Testverbindungen zu voreingestellten Zeitpunkten in die Mikro
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos