JoVE Encyclopedia of Experiments
Krebsforschung
0 Ansichten • 3:56 Min. • April 30th, 2023
- Das Knochenmark, oder das schwammige Gewebe in den meisten Knochen, ist der primäre Ort der Blutzellenbildung. Die Analyse von Knochenmarkzellen hilft bei der genauen Diagnose vieler blutbedingter Erkrankungen wie Leukämie. Die hintere obere Beckenwirbelsäule ist eine leicht zugängliche Stelle und eine reichhaltige Quelle für Knochenmark.
Um eine Knochenmarkpunktion zu erhalten, lassen Sie den Patienten in einer lateralen Dekubitusposition liegen. Desinfizieren und betäuben Sie die vorgesehene Aspirationsstelle. Führen Sie eine Aspirationsnadel ein und schieben Sie sie durch die Haut, das Unterhautgewebe und den kortikalen Knochen, um Zugang zu dem schwammigen spongiösen Knochen zu erhalten, der das Knochenmark enthält.
Entfernen Sie das Mandrin von der Nadel und setzen Sie eine leere Spritze auf. Aspirieren Sie das Knochenmark. Übertragen Sie einen Teil des Aspirats in ein gerinnungshemmendes Röhrchen zur Lagerung ohne Blutgerinnung. Übertragen Sie das restliche Aspirat in ein Uhrglas.
Lokalisieren Sie winzige Knochenmarkzellaggregate oder -spitzen und übertragen Sie diese auf einen Objektträger. Gleiten Sie vorsichtig mit einem zweiten Glasobjektträger über die Ähre, um einen Abstrich zu bilden. Trocknen und färben Sie den Abstrich für die morphologische Untersuchung der Knochenmarkzellen. Das folgende Protokoll zeigt die Aspiration einer Knochenmarkprobe aus der hinteren oberen Beckenwirbelsäule eines Patienten mit akuter myeloischer Leukämie zur morphologischen Beurteilung von Zellen.
- Markieren Sie mit dem Patienten in der lateralen Dekubitusposition die hintere Beckenwirbelsäule superior mit einem Stift und desinfizieren Sie die Haut des vorgesehenen Biopsiebereichs mit 0,5 % bis 1 % Chlorhexidin in Ethanol in einer nach außen kreisenden Bewegung. Nehmen Sie nach der Verabreichung eines Lokalanästhetikums eine 15-Gauge-2,8-Zoll-Nadel mit dem proximalen Ende in der Handfläche und dem Zeigefinger gegen die Seite des Metallschafts der Nadel in der Nähe der Spitze zur Kontrolle. Führen Sie die Nadel mit sanftem, aber festem Druck mit einer schnellen, abwechselnd pronierenden/supinierenden Bewegung durch die anästhesierte Haut in Richtung der Beckenwirbelsäule ein.
Wenn die Nadel mit der hinteren Beckenwirbelsäule in Berührung kommt, entfernen Sie das Mandrin und befestigen Sie eine leere 10-Milliliter-Spritze an der Nadel. Ziehen Sie den Kolben vorsichtig zurück, um einen Unterdruck in der Spritze zu erzeugen, bis bis zu 10 Milliliter Knochenmarknadeln entnommen wurden.
- Nehmen Sie nicht mehr als 10 mil Knochenmark pro Aspirat, um eine Hämodilution zu vermeiden.
- Entfernen Sie die Spritze und setzen Sie das Mandrin wieder auf die Nadel. Werfen Sie dann etwa 2 Milliliter des Knochenmarks in ein Uhrglas aus und stellen Sie sicher, dass genügend Probe entnommen wird, um in ein mit Heparin beschichtetes 8-Milliliter-Röhrchen injiziert zu werden, und drehen Sie das Röhrchen sofort um.
- Um eine Gerinnung zu verhindern, ist es wichtig, das gerinnungshemmende Röhrchen umzudrehen, sobald das Knochenmark hinzugefügt wird.
- Für eine optimale morphologische Beurteilung übertragen Sie mit einem Kunststoffspatel die Spikulen aus dem Aspirat im Uhrglas auf einen Objektträger und schieben Sie vorsichtig einen weiteren Objektträger auf das Mark. Nach dem Trocknen färben Sie die Spikulen mit May-Grünwald-Giemsa für die lichtmikroskopische Analyse. Legen Sie das Knochenmarkröhrchen in einen Kunststoffhalter und legen Sie den Halter in einen Kunststoffbehälter mit einer Umgebungsgelpackung und einem ausgefüllten Antragsformular.