CFU-Assay auf Methylcellulose-Basis: Eine Methode zur Bestimmung der Wirkung von Anti-Krebs-Wirkstoffen auf die Koloniebildung in leukämischen Zellen

- Manchmal durchläuft eine Stamm- oder Vorläuferzelle Mutationen, aus denen eine leukämische Stammzelle entsteht. In diesen Zellen werden bestimmte Proteine hochreguliert, und die Verwendung von Antikrebsmitteln gegen solche Proteine kann helfen, das Zellwachstum zu kontrollieren. Die Wirkung dieser krebshemmenden Verbindungen kann mit Hilfe eines CFU-Assays analysiert werden, indem die Anzahl und Größe der gebildeten Kolonien überwacht wird.

Beginnen Sie damit, Vorläuferzellen einer leukämischen Maus zu entnehmen und sie in einem geeigneten Nährmedium zu verdünnen. Geben Sie diese Zellsuspension zusammen mit der entsprechenden krebshemmenden Verbindung zu Methylcellulose, die mausspezifische Zytokine enthält, und gießen Sie sie in eine Petrischale. Inkubiere diese Mischung, bis die Kolonien erscheinen. Methylcellulose ist eine chemisch inerte, halbfeste Matrix, die die Zellmigration verhindert, während Zytokine die Vorläuferzellen dazu anregen, sich zu differenzieren und Kolonien mit erkennbaren Nachkommen zu bilden.

Als nächstes färben Sie die Bienenvölker mit Jodnitrotetrazoliumchlorid oder INT und inkubieren über Nacht, bis die Bienenvölker dunkelrotbraun werden. Mitochondriale