Enzymatischer Tumorverdau: Ein Verfahren zur Erzeugung von Tumorzellsuspensionen aus patienteneigenen Xenotransplantat-Krebs-Mausmodellen

- Patienten-abgeleitete Xenotransplantat- oder PDX-Modelle sind experimentelle Tiermodelle, die Tumorzellen oder Tumorfragmente tragen, die direkt von einem menschlichen Patienten implantiert wurden. Diese Modelle simulieren die Mikroumgebung des menschlichen Tumorgewebes und ermöglichen so die Ausbreitung des Tumors. Um Tumorzellsuspensionen zu erzeugen, wird zunächst der vom Patienten stammende Tumorteil von der Empfängermaus geerntet.

Zerkleinern Sie die Tumorsegmente, um kleinere Fragmente zu erhalten. Behandeln Sie die Fragmente mit einer Aufschlusslösung, die einen Cocktail aus Kollagenase-, Hyaluronidase- und Desoxyribonuklease-Enzymen enthält. Kollagenase- und Hyaluronidase-Enzyme verdauen die extrazelluläre Matrix, die das Gewebe zusammenhält, und erleichtern so die Freisetzung einzelner Zellen in die Suspension.

Die Desoxyribonuklease baut jegliche freie DNA ab, die aus lysierten Zellen freigesetzt wird. Filtrieren Sie nun die verdaute Probe durch Zellsiebe, um unverdautes Gewebe und Ablagerungen zu entfernen und Einzelzellsuspensionen zu erhalten. Zentrifugieren, um die Zellen zu trennen. Der Überstand mit der Aufschlussmischung ist zu verwerfen und das Zellpellet in fri