JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Krebsforschung
0 Aufrufe • 3:24 Min. • April 30th, 2023
- Mikrometastasen sind eine kleine Gruppe von Krebszellen, die sich von einem Primärtumor abstoßen und sich über Blut- oder Lymphknoten in verschiedene Teile des Körpers ausbreiten. Um Mikrometastasen zu erkennen, suspendieren Sie Darmkrebs-Organoidzellen in PBS, um den pH-Wert aufrechtzuerhalten, und laden Sie die Zellsuspension in eine Spritze. Legen Sie anschließend eine betäubte Maus in Bauchlage auf eine Operationsliege. Machen Sie mit einer Schere einen kleinen Schnitt am unteren Teil der linken Flanke und legen Sie die Milz frei. Ziehen Sie die Milz vorsichtig mit einer Pinzette heraus und injizieren Sie die Zellsuspension langsam in die Milz. Verschließen Sie den Schnitt mit Nähten und bringen Sie das Tier in seinen Käfig zurück. Überwachen Sie es, bis es sich erholt hat.
Nach der gewünschten Injektionszeit opfern Sie die Maus, um Primärtumore und verschiedene Gewebe zu präparieren. Betrachten Sie präpariertes Gewebe unter einem Fluoreszenzmikroskop. GFP-exprimierende Krebszellen entwickeln einen Primärtumor an der injizierten Stelle in der Milz. Einige Krebszellen aus dem Primärtumor wandern in ein anderes Organ, in der Regel die Leber, um mikrometastasierende Kolonien zu
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