Traktionszytometrie-Assay: Eine Methode zur Quantifizierung der Zugkraft, die von Krebszellen auf die EZM ausgeübt wird

- Zellen erzeugen mechanische Kräfte, die auf eine extrazelluläre Matrix wirken. Diese Kraft wird als Zugkraft bezeichnet. Zellen üben Zugkräfte aus, um verschiedene Aufgaben wie Migration und Proliferation zu erfüllen.

Metastasierende Krebszellen üben größere Zugkräfte aus als gesunde Zellen, daher führen wir einen Traktionszytometrie-Assay durch, um die Zugkräfte zu messen, die von Zellen auf elastische Substrate ausgeübt werden. Beginnen Sie damit, die gewünschte Menge an Darmkrebszellen auf ein Polyacrylamid-Hydrogel zu säen, ein Gel, das ECM in vitro nachahmt. Das Gel besteht aus Fibronektin-Proteinen, die den Zellen helfen, an der Oberfläche zu haften, und fluoreszierenden Kügelchen, die als Marker für Positionsänderungen dienen.

Inkubieren Sie die Zellen für den gewünschten Zeitraum. Die Zellen haften an dem Gel und üben die Zugkraft aus, die eine Verschiebung der fluoreszierenden Kügelchen bewirkt. Legen Sie nun die Platte unter ein Fluoreszenzmikroskop und machen Sie ein Bild der verschobenen fluoreszierenden Kügelchen. Geben Sie anschließend die gewünschte Menge Trypsin in die Platte, um die Zellen zu lösen, und analysieren Sie die von den Zellen ausgeübte Zugkraft mit ei