JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurowissenschaften
0 Ansichten • 1:23 Min. • March 4th, 2025
Nehmen Sie chemisch fixierte, in Paraffin eingebettete Hirnschnitte von einer Ratte mit Hirninfarkt, bei der ein eingeschränkter Blutfluss zum Zelltod in der betroffenen Region führt.
Tauchen Sie das Gewebe in Xylol, um das Paraffin aufzulösen.
Tauchen Sie das Gewebe in absoluten Alkohol, um restliches Xylol zu entfernen.
Hydratisieren Sie das Gewebe, indem Sie es durch abnehmende Alkoholkonzentrationen führen.
Spülen Sie das Tuch mit Wasser ab, um Restalkohol zu entfernen.
Tragen Sie Hämatoxylin auf, einen basischen Farbstoff, der an die DNA bindet und die Zellkerne violett färbt.
Mit Wasser und saurem Alkohol abspülen, um überschüssiges Hämatoxylin zu entfernen.
Spülen Sie mit einer alkalischen Lösung, um den Kernfleck blau zu färben.
Tragen Sie Eosin auf, einen sauren Farbstoff, der positiv geladene zytoplasmatische und extrazelluläre Matrixproteine rosa färbt.
Entwässern Sie das Gewebe mit steigenden Alkoholkonzentrationen.
Tauchen Sie das Gewebe in Xylol, um es zu reinigen, montieren Sie es dann und visualisieren Sie es unter einem Mikroskop.
Kontrollbereiche erscheinen rosa mit blauen Zellkernen, während Infarktbereiche aufgrund unzureichender Färbung durch Zelltod blass erscheinen.