JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 1:21 Min. • March 4th, 2025
Neuritische Plaques (NPs) sind extrazelluläre Amyloid-β-Aggregate, die von beschädigten Nervenenden umgeben sind, die für die Pathologie der Alzheimer-Krankheit charakteristisch sind.
Um diese NPs sichtbar zu machen, nehmen Sie einen entparaffinisierten, fixierten menschlichen Gehirnschnitt.
Behandeln Sie den Abschnitt mit periodischer Säure, um reaktive Gruppen in NPs zu oxidieren und deren Reaktivität zu verbessern.
Mit destilliertem Wasser waschen, um Säurereste zu entfernen.
Inkubieren Sie den Abschnitt in alkalischem Silberiodid, damit Silberionen an die oxidierten reaktiven Gruppen binden können.
Mit einer milden Säure waschen und in destilliertem Wasser abspülen.
Fügen Sie eine Entwicklerlösung hinzu, die ein Reduktionsmittel enthält, um Silberionen in metallisches Silber zu reduzieren, wodurch sich ein brauner Fleck auf den NPs bildet.
Mit milder Säure und destilliertem Wasser waschen.
Tragen Sie Goldchlorid auf, um den Fleckenkontrast zu verbessern. Mit destilliertem Wasser abspülen.
Mit Natriumthiosulfat behandeln, um den Fleck zu stabilisieren, und erneut ausspülen.
Dehydrieren Sie den Abschnitt und montieren Sie ihn.
Visualisieren Sie mit einem Lichtmikroskop die dunkel gefärbten NPs innerhalb des Schnitts.