JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurowissenschaften
0 Ansichten • 1:18 Min. • March 4th, 2025
Chlamydia pneumoniae sind pathogene Bakterien, die das menschliche Gehirn infizieren können.
Um diese Bakterien nachzuweisen, wird ein entparaffinisierter, rehydrierter, bakterieninfizierter menschlicher Gehirnschnitt mit exponierten Proteinantigenen und inaktivierter endogener Phosphatase entnommen.
Fügen Sie eine Blockierungslösung hinzu, um eine unspezifische Antikörperbindung zu verhindern.
Inkubieren Sie mit primären Antikörpern, die an das bakterielle Zielantigen binden.
Mit einem Puffer waschen, um ungebundene Antikörper zu entfernen.
Fügen Sie die Blockierungslösung hinzu, um die Spezifität des Sekundärantikörpers zu erhöhen.
Inkubieren Sie mit alkalischen Phosphatase-konjugierten Sekundärantikörpern, die an Primärantikörper binden.
Mit Wasser abspülen, um überschüssige Antikörper zu entfernen.
Fügen Sie ein chromogenes Substrat hinzu, das mit alkalischer Phosphatase reagiert und einen farbigen Niederschlag bildet.
Mit Wasser abspülen, um überschüssigen Niederschlag zu entfernen.
Füge einen Farbstoff hinzu, um die Zellkerne zu färben.
Fügen Sie Montagemedien hinzu, um den Abschnitt zu mounten.
Visualisieren Sie unter einem Lichtmikroskop gefärbte Bakterien im Hirngewebe.