JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 1:24 Min. • March 4th, 2025
Beginnen Sie mit einer Färbeschale mit fixierten Gewebeschnitten des Maushirns, die eine neuronale Degeneration aufweisen.
Füge doppelt destilliertes Wasser hinzu, um die Abschnitte zu waschen.
Legen Sie die Schnitte in eine Silbernitratlösung und inkubieren Sie.
Silberionen binden selektiv an degenerierende Neuronen.
Tauchen Sie die Abschnitte in Aceton, um sie zu dehydrieren, und behandeln Sie sie dann mit einer alkalischen Silberlösung, um die Silberablagerungen zu stabilisieren.
Inkubieren Sie die Abschnitte in einer reduzierenden Mischlösung, um die gebundenen Silberionen in metallische Silberablagerungen umzuwandeln.
Spülen Sie mit Essigsäure, um die Reaktion zu stoppen.
Dies hebt degenerierende Neuronen im Vergleich zu ungefärbten gesunden Neuronen hervor.
Legen Sie die Abschnitte in ein mildes Bleichmittel, um das Hintergrundsilber zu entfernen, und spülen Sie sie dann mit doppelt destilliertem Wasser ab.
Anschließend kurz in ein starkes Bleichmittel tauchen, um hartnäckige Silberablagerungen aus dem Hintergrund zu entfernen.
Fügen Sie ein stabilisierendes Reagenz hinzu, um die Silberablagerungen auf den Neuronen zu stabilisieren, und spülen Sie es dann mit doppelt destilliertem Wasser ab. Zum Schluss mit einem Fixiermittel behandeln, um den Fleck dauerhaft zu fixieren.
Die dunkler gefärbten Regionen deuten auf eine neuronale Degeneration hin.