JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurowissenschaften
0 Ansichten • 1:20 Min. • March 4th, 2025
Nehmen Sie neurale Stammzellen oder NSCs und mikrovaskuläre Endothelzellen des Gehirns oder BMECs im gewünschten Verhältnis.
Suspendieren Sie das Zellgemisch in einer extrazellulären Matrix oder EZM-Lösung.
Die Mischung auf dem Boden einer konfokalen Schale verteilen und inkubieren.
Die EZM polymerisiert und bildet ein dreidimensionales Gerüst, das die Zelladhäsion ermöglicht.
Verteilen Sie eine Schicht NSCs in der ECM-Lösung auf die erstarrte Schicht.
Inkubieren, um ECM zu polymerisieren. Dies ahmt das geschichtete Gehirngewebe nach und verbessert die Zell-Zell-Interaktionen.
Medien hinzufügen und inkubieren.
Die Wachstumsfaktoren in den Medien fördern die Zellproliferation und erleichtern es BMECs, sich in gefäßähnlichen Netzwerken zu organisieren und eine neurovaskuläre Einheit oder NVU zu bilden.
Ersetzen Sie die Medien durch Medien, die Vitamin A enthalten, um die Differenzierung von NSCs in Neuronen und Gliazellen zu erleichtern.
Die Zellen innerhalb der NVU werden spontan zu einer modularen Organisation zusammengefügt, die eine gehirnähnliche Mikroumgebung nachbildet.