JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurowissenschaften
0 Ansichten • 1:29 Min. • March 4th, 2025
Nehmen wir chemisch fixierte Hirnschnitte, die aus einem weiblichen Mausmodell der Alzheimer-Krankheit gewonnen wurden.
Diese Abschnitte enthalten neurofibrilläre Tangles – abnormale Aggregate des Tau-Proteins, die in Hippocampus-Neuronen vorkommen.
Waschen Sie die Abschnitte mit Puffer und anschließend mit entionisiertem Wasser.
Mit periodischer Säure behandeln, um Glykosylgruppen, die mit den Aggregaten verbunden sind, zu oxidieren und Aldehydgruppen zu bilden.
Mit entionisiertem Wasser waschen und eine alkalische Silberjodidlösung hinzufügen. Die Silberionen bilden mit den Aldehyden Komplexe, wodurch Keimbildungsstellen entstehen.
Mit einer verdünnten, schwachen Säure waschen, um ungebundenes Silber zu entfernen und den pH-Wert zu neutralisieren.
Mit entionisiertem Wasser abspülen.
Fügen Sie eine gekühlte Entwicklerlösung hinzu, die ein Reduktionsmittel enthält, um Silberionen in metallisches Silber umzuwandeln, wodurch eine blassbraune Farbe entsteht.
Mit einer verdünnten, schwachen Säure abspülen, um die Entwicklung zu stoppen.
Montieren Sie die Abschnitte, entwässern Sie sie mit zunehmender Alkoholkonzentration und tragen Sie ein Einbettmedium auf.
Verschließen Sie die Abschnitte mit einem Deckglas.
Visualisieren Sie mit einem Lichtmikroskop die neurofibrillären Verwicklungen.