JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurowissenschaften
0 Ansichten • 1:26 Min. • August 7th, 2025
Beginnen Sie mit einer kontaktlosen Co-Kultur von Neuronen und Oligodendrozyten.
Eine permeable Membran trennt die Neuronen im Transwell-Insert von den Oligodendrozyten im unteren Well.
Fügen Sie dem Einsatz Kalium hinzu, um den extrazellulären Kaliumspiegel zu erhöhen, wodurch der Ausfluss von intrazellulärem Kalium gehemmt wird.
Die Kaliumakkumulation depolarisiert die Neuronen, löst die Öffnung spannungsgesteuerter Kalziumkanäle aus und ermöglicht den Kalziumeinfluss.
Der Einstrom stimuliert die Freisetzung von exzitatorischen Neurotransmittern, die über die durchlässige Membran diffundieren, um den Boden gut zu erreichen und Rezeptoren auf Oligodendrozyten zu aktivieren, was zu einem Kalziumeinstrom führt.
Der Anstieg des Kalziumspiegels aktiviert Signalwege, die das Einknospen der Membranen in frühen Endosomen induzieren.
Die Knospe umschließt zytoplasmatische Proteine und RNAs in Vesikel, die als Exosomen bezeichnet werden, in multivesikulären Körpern oder MVBs.
Die MVBs verschmelzen mit der Plasmamembran der Oligodendrozyten und geben Exosomen an die extrazelluläre Umgebung ab.
Die sezernierten Exosomen sind nun bereit, die interzelluläre Kommunikation zu beurteilen.