Gezielte Virusabgabe an kortikospinale Neuronen bei einer neugeborenen Ratte zur Untersuchung von Rückenmarksverletzungen

Beginnen Sie mit einer anästhesierten neugeborenen Ratte mit einem chirurgisch freiliegenden zervikalen Rückenmark.

Dieser Ratte wurde ein anterogrades Virus injiziert, das für einen Designer-Rezeptor und ein fluoreszierendes Protein kodiert. Das Virus zielt auf Neuronen des kortikospinalen Trakts (CST) im somatomotorischen Kortex des Gehirns ab.

Identifiziere die Mittellinie des Rückenmarks mit Hilfe der Spinalarterie.

Positionieren Sie eine Glasnadel mit einem retrograden Virus, das für ein Rekombinase-Enzym kodiert, hinter der Ziel-Spinallamina, in der sich die CST-Axonendigungen befinden.

Senken Sie die Nadel in das Rückenmark und injizieren Sie das Virus.

Lassen Sie das Virus diffundieren, ziehen Sie dann langsam die Nadel zurück und nähen Sie den Schnitt.

Das Virus dringt in das CST-Axonterminal ein und wandert retrograd in den Zellkörper, wo es das Rekombinase-Enzym exprimiert.

Dieses Enzym aktiviert das Transgen, das vom anterograden Virus geliefert wird, und ermöglicht die Expression des Designer-Rezeptors und des fluoreszierenden Proteins nur in doppelt infizierten Neuronen. Diese Methode ermöglicht die gezielte Analyse von CST-Neuronen bei Rückenmarksverletzungen.

Verwenden Sie