Stereotaktischer Cisterna magna-Ansatz für die therapeutische Verabreichung in einem Mausmodell

Beginnen Sie mit einer betäubten Maus auf einem stereotaktischen Rahmen mit geneigtem Kopf.

Ein Kopfhautschnitt bei der Maus legt die Dura mater frei, die die Cisterna magna bedeckt, einen mit Liquor oder Liquor gefüllten Raum zwischen Kleinhirn und Hirnstamm.

Fassen Sie mit einer Pinzette die Dura und schaffen Sie eine kleine Öffnung darin, um Zugang zur Cisterna magna zu erhalten.

Verwenden Sie einen sterilen Tupfer, um überschüssigen Liquor zu entfernen.

Identifizieren Sie den anatomischen Referenzpunkt, an dem das Rückenmark mit dem Hirnstamm verbunden ist, und bestimmen Sie dann die stereotaktischen Koordinaten.

Senken Sie den stereotaktischen Arm ab, der die Mikropipette hält, die die therapeutische Lösung enthält.

Schieben Sie die Mikropipette durch die Cisterna magna in den Hirnstamm an den vorgegebenen Koordinaten

.

Injizieren Sie die Lösung langsam und halten Sie die Pipette kurz fest, um einen Rückfluss zu verhindern.

Die therapeutische Lösung erreicht direkt den Hirnstamm und die oberen Rückenmarksregionen, die mit herkömmlichen stereotaktischen Methoden nur schwer zu erreichen sind.

Betrachten Sie die dorsale Oberfläche des Hirnstamms mit detaillierten Orientierungspunkten durch die offene Dura.

Fassen Sie mit der abgewinkelten Pinzette die Dura, die sich vom Hinterhauptbein bis zum Atlas erstreckt, und bohren Sie dann mit der Federschere eine kleine Öffnung von etwa 0,5 bis 1,5 Millimetern in die Dura. Sobald die Dura geöffnet ist, lassen Sie überschüssige Zerebrospinalflüssigkeit mit einem sterilen Wattestäbchen ab. Der Obex, der Punkt, an dem der Zentralkanal in den vierten Ventrikel mündet, ist der Standard-anterior-posteriore und mediolaterale Nullpunkt.

Positionieren Sie die Pipette oder Spritze mit dem stereotaktischen Arm auf das Ziel. Senken Sie den Arm des dorsalen Armes auf die dorsale Fläche, die sich aus dem dorsoventralen Nullpunkt bildet. Senken Sie dann die Pipette auf den Hirnstamm und injizieren Sie die Lösung.

Lassen Sie die Nadel nach der Injektion ein bis fünf Minuten lang an Ort und Stelle, um eine Nadelspur bei der Verwendung von Volumina zwischen 3 und 50 Nanolitern zu vermeiden. Heben Sie dann die Pipette oder Spritze mit dem stereotaktischen Arm an und wiederholen Sie dies für mehrere Ziele.