Implantation einer flexiblen biokompatiblen Sonde in ein Glioblastom-Mausmodell

Sichern Sie eine Maus in einem stereotaktischen Rahmen mit einem chirurgisch freigelegten Gehirn, das ein präimplantiertes Glioblastom-Sphäroid enthält.

Tragen Sie Kochsalzlösung auf das exponierte Gehirn auf, um die Hydratation des Gewebes aufrechtzuerhalten.

Positionieren Sie die flexible Sonde über der Kochsalzschicht und stellen Sie sicher, dass die Kontaktkissen auf dem Rücken der Maus aufliegen und die Elektroden über dem Glioblastom ausgerichtet sind.

Die Sonde besteht aus einem dünnen, flexiblen Polymersubstrat mit strukturierten Goldelektroden, die mit biokompatiblem leitfähigem Polymer beschichtet sind, um eine optimale elektrische Leistung und Gewebekompatibilität zu gewährleisten.

Absorbieren Sie überschüssige Kochsalzlösung, so dass nur eine dünne Schicht übrig bleibt.

Tragen Sie Silikonkleber auf, um die Elektroden zu stabilisieren, und platzieren Sie dann ein Deckglas.

Tragen Sie Zahnzement um das Deckglas auf und befestigen Sie die Kontaktpads auf der Rückseite der Maus.

Bauen Sie einen Zementbrunnen für das Einbringen von Flüssigkeit.

Verabreichen Sie später eine postoperative Analgesie und halten Sie die thermische Unterstützung für die Genesung der Maus aufrecht.

Die implantierten Elektroden geben elektrische Impulse oberhalb des Glioblastoms für eine gezielte Therapie mit gepulsten elektrischen Feldern in neurotherapeutischen Anwendungen ab.

Geben Sie einen Tropfen DPBS, um die Kraniotomie abzudecken. Legen Sie die flexible Elektrode auf den DPBS-Tropfen und legen Sie die Rückseite der Sonde mit den Kontaktpads vorsichtig auf die Rückseite der Maus. Absorbieren Sie den DPBS-Tropfen mit einem kleinen Stück Papier, bis die Sonde flach auf der Dura aufliegt und der Krümmung des Gehirns folgt, wobei Sie sicherstellen, dass die kleine Schicht Kochsalzlösung unter den Elektroden verbleibt, um als Barriere gegen Klebstoffspritzen zu wirken.

Geben Sie einen kleinen Tropfen Silikonkleber auf die Sonde und decken Sie sie mit einem fünf Millimeter runden Deckglas ab. Schieben Sie das Deckglas nach unten, bis das Silikon gleichmäßig verteilt ist und der Abstand zwischen dem Deckglas und der Sonde minimal ist. Warten Sie dann 30 Sekunden, bis sich das Silikon verfestigt hat.

Um das Deckglas zu sichern, tragen Sie schnell Sekundenkleber auf die Seiten auf und drücken Sie ihn nach unten, bis der Kleber fest wird. Tragen Sie mit einem Zahnstocher Sekundenkleber auf den Hals der Sonde auf und achten Sie darauf, dass der Sekundenkleber unter den Hals gezogen wird, um einen stabilen Halt zu gewährleisten. Decken Sie den Schädel mit Zahnzement ab, um eine chronische Kappe zu bilden, und achten Sie besonders darauf, nur die Ränder des Deckglases zu bedecken.

Heben Sie die Rückseite der Sonde an und tragen Sie Zement unter den Hals der Sonde auf. Reste der Sonde auf den Zement, bevor er aushärtet. Drücken Sie den Hals der Sonde vorsichtig nach unten, um ihre Oberfläche auf der gleichen Höhe wie das Deckglas zu platzieren und nicht im Weg des Mikroskopobjektivs während des Experiments.

Decken Sie die Oberseite des Sondenhalses mit nicht mehr als 1,5 Millimeter Zahnzementschicht ab, um einen festen Halt der Sonde zu erreichen. Bauen Sie einen Zementbrunnen mit einem 1,5 Millimeter breiten Grat von ein bis zwei Millimetern um das Deckglas, um ein Becken für die Immersionsflüssigkeit für die Zwei-Photonen-Bildgebung zu schaffen. Nachdem der Zement ausgehärtet ist, verabreichen Sie eine postoperative Analgesie und halten Sie das Tier bis zur Genesung warm, indem Sie es in ein Papiertuch wickeln und in die Nähe einer Infrarotlampe legen.