Transplantation von aus Stammzellen gewonnenen neuronalen Vorläuferzellen in humane kortikale Schnitte

Beginnen Sie mit einer adhärenten Kultur von aus Stammzellen gewonnenen neuronalen Vorläuferzellen, die für die Differenzierung in kortikale Neuronen vorbereitet sind.

Entfernen Sie das Medium und fügen Sie dann ein Enzym hinzu, um die extrazelluläre Matrix zu stören und die Zellen abzulösen.

Verwenden Sie einen Inhibitor, um das Enzym zu neutralisieren, und fügen Sie dann ein frisches Medium hinzu.

Übertragen Sie die Suspension in ein Röhrchen, zentrifugieren Sie sie und entsorgen Sie den Überstand, um die Zellen zu isolieren.

Resuspendieren Sie die Zellen in einer Basalmembranmatrix, um die Transplantation in das Hirngewebe zu erleichtern, und laden Sie sie dann in ein kaltes Kapillarröhrchen.

Nehmen Sie eine menschliche kortikale Scheibe auf eine Transwell-Anordnung, die ein Medium enthält.

Entfernen Sie einen Teil des Mediums und injizieren Sie dann Tröpfchen der Zellsuspension in das Gewebe.

Inkubieren, damit sich die Matrix verfestigen kann.

Fügen Sie ein Medium hinzu, um das Gewebe einzutauchen, und inkubieren Sie dann, damit sich Vorläuferzellen in Neuronen differenzieren, ihre Neuriten erweitern und Synapsen mit kortikalen Neuronen des Wirts bilden können.

Der kortikale Schnitt ist