Stereotaktische Injektion von Viren für eine stabile genetische Veränderung in einem Mausmodell

Beginnen Sie mit einer anästhesierten Maus mit einem freiliegenden Schädel in einem stereotaktischen Rahmen.

Senken Sie den Spritzenhalter, bis die Nadelspitze mit dem Bregma, einem Referenzpunkt des Schädels, ausgerichtet ist.

Lokalisieren Sie anhand der vorgegebenen stereotaktischen Koordinaten die ventrikulär-subventrikuläre Zone oder

V-SVZ, eine neurogene Nische, die hauptsächlich neurale Stammzellen oder NSCs enthält, und markieren Sie diese Region.

Entfernen Sie die Spritze und bohren Sie vorsichtig ein kleines Loch, um Hirnschäden zu vermeiden.

Füllen Sie eine sterile Spritze mit Viren, die das Transgen tragen, und positionieren Sie die Nadel über der Gehirnoberfläche.

Setzen Sie die Spritze wieder auf und senken Sie sie, bis die Spitze die innerste Oberflächenschicht des Gehirns berührt.

Dringen Sie in das Gehirn ein, um die V-SVZ zu erreichen, injizieren Sie das Virus langsam, halten Sie es kurz und ziehen Sie dann die Spritze zurück.

In der V-SVZ gelangt das Virus über die Membranfusion in NSCs. Seine RNA-Reverse wird in DNA transkribiert.

Diese DNA integriert sich dann in das NSC-Genom und ermöglicht so eine stabile genetische Modifikation von NSCs.

Nach der Narkose rasiert eine s