JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 6:05 Min. • August 29th, 2025
Sichern Sie eine betäubte schwangere Maus mit ihrer freiliegenden Gebärmutter, die Präneurulationsembryonen enthält. In diesem Stadium ist die Neuralplatte offen und direkt dem Fruchtwasser ausgesetzt.
Positionieren Sie die ausgewählten Embryonen auf einer Petrischale mit einer elastischen Membran, um sie zu stabilisieren. Sichern Sie die Embryonen und tragen Sie Kochsalzlösung zur Flüssigkeitszufuhr auf.
Richten Sie die Ultraschallsonde über dem Embryo aus und messen Sie den Durchmesser der Fruchthöhle, um das optimale Injektionsvolumen zu berechnen.
Positionieren Sie eine Nanoinjektionsnadel mit einer lentiviralen Lösung mit hohem Titer in einem nahezu senkrechten Winkel über dem Zielembryo.
Injizieren Sie ein präzises kleines Volumen in die Fruchthöhle, ziehen Sie die Nadel vorsichtig zurück und entfernen Sie die Ultraschallsonde.
Schieben Sie die Embryonen vorsichtig zurück in die Maus.
Das injizierte Lentivirus verschmilzt mit neuralen Plattenzellen und setzt sein genetisches Material frei, das eine reverse Transkription in die DNA durchläuft und in das Wirtsgenom integriert wird.
Dies ermöglicht eine stabile Genmanipulation in den Zellen der neuralen Platte und unterstützt potenziel
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