JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 1:44 Min. • August 29th, 2025
Beginnen Sie mit Ratten-Phäochromozytom-12- oder PC12-Zellen in basischen Wachstumsmedien.
Nehmen Sie eine mit Kollagen beschichtete Vertiefung mit Differenzierungsmedien und legen Sie die Zellen hinein.
Inkubieren, um die Zelladhäsion zu erleichtern.
Nehmen Sie eine abbaubare nanostrukturierte poröse Silizium- oder PSi-Folie.
Die Poren der Folie sind mit dem Nervenwachstumsfaktor (NGF) beladen, der durch elektrostatische Wechselwirkungen zwischen dem negativ geladenen NGF und der positiv geladenen PSi-Oberfläche adsorbiert wird.
Legen Sie die mit NGF beladene PSi-Folie in die Vertiefung und inkubieren Sie.
Wechseln Sie das Medium in regelmäßigen Abständen.
Das NGF in der PSi-Folie wird durch Diffusion und beim Abbau des Silikongerüsts an das Medium abgegeben.
Dieses Verabreichungssystem ermöglicht eine anhaltende Freisetzung von NGF mit einer kontrollierten Geschwindigkeit über einen längeren Zeitraum.
NGFs interagieren mit der PC12-Zelle, ermöglichen ihr Überleben und erleichtern das Wachstum und die Verzweigung von Neuriten.
Samen einmal 10 bis zu den vierten Zellen pro Quadratzentimeter Arbeitsfläche auf einer Colligen Typ eins beschichteten Platten in Gegenwart von Differenzierungsmedium. Legen Sie die Platten in den Inkubator.
Nach 24 Stunden bei 37 Grad Celsius wird jeder Platte frischer muriner Beta-NGF oder NGF-beladener poröser Siliziumträger zugesetzt und die Platten wieder in den Inkubator gestellt.