Virusvermittelter Gentransfer in den dorsalen Cochlea-Kern der Maus zur lichtinduzierten auditiven Stimulation

0 Aufrufe • 3:19 Min. • August 29th, 2025

Beginnen Sie mit einer betäubten Maus, deren Schädel freigelegt ist.

Der Schädel weist eine Kraniotomie über dem interparietalen Knochen auf, links von der Mittellinie und kaudal zur Lambdoideusnaht, wobei die Dura entfernt wurde, um das Kleinhirn freizulegen.

Aspirieren Sie das laterale linke Kleinhirn, um den darunter liegenden dorsalen Cochlea-Kern oder DCN freizulegen, eine Hirnstammstruktur, die Neuronen enthält, die auditive Signale verarbeiten.

Fügen Sie Kochsalzlösung hinzu, um die Blutgerinnung zu verhindern und die Restflüssigkeit zu entfernen.

Positionieren Sie eine Mikrospritze, die einen viralen Vektor enthält, der für Opsin, einen lichtempfindlichen Ionenkanal, kodiert.

Senken Sie die Nadel in das DCN ab.

Injizieren Sie die Virussuspension in kontrollierter Geschwindigkeit und ziehen Sie dann die Nadel zurück.

Nähen Sie den Schnitt und lassen Sie die Maus sich erholen.

Das injizierte Virus bindet an neuronale DCN-Rezeptoren und durchläuft eine Endozytose.

Im Inneren des neuronalen Kerns löst die virale DNA die Genexpression aus, die zur Opsinproduktion führt.

Das Modell ist bereit für die lichtinduzierte Stimulation der Hörbahn.

Verwenden Sie ein Saugrohr mit fünf französischen

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