Gezielte Verabreichung von Medikamenten in einem Mausmodell über Cisterna Magna Injektion

Beginnen Sie mit einer anästhesierten Maus, die ein fluoreszierendes Markergen exprimiert und in einem stereotaktischen Rahmen gesichert ist.

Der Kopf ist nach unten geneigt, um den Zugang zur Cisterna magna, dem mit Liquor oder Liquor gefüllten Raum zwischen Kleinhirn und Hirnstamm, zu erleichtern.

Tragen Sie Augensalbe auf, rasieren Sie den Hals und sterilisieren Sie ihn.

Machen Sie einen Einschnitt in der Mittellinie, um die Membran freizulegen, die die Cisterna magna bedeckt.

Ziehen Sie das Gewebe mit einem Separator zurück, um an die Cisterna magna zu gelangen.

Nehmen Sie eine Mikrospritze, die mit einem Induktormedikament gefüllt und mit einer gebogenen Nadel versehen ist.

Führen Sie die Nadel ein und stechen Sie die Membran ein, um die Cisterna magna zu erreichen.

Injizieren Sie das Arzneimittel langsam, um eine gleichmäßige Dispersion im Liquor zu erzielen.

Das Medikament dringt in die Oberflächenzellen des Gehirns ein und löst die Expression des Markergens aus, wodurch rot fluoreszierende Proteine produziert werden.

Der Liquorfluss verhindert die Diffusion von Medikamenten in tiefere Hirnregionen.

Die Fluoreszenzbildgebung bestätigt die selektive Markierung von Oberflächenzellen und zeigt eine gezielte Wirkstoffabgabe an Liquor-exponierte Regionen.

Betäuben Sie das Tier in der Isoflurankammer.

Stellen Sie dann die Mauskopfhalterung so ein, dass das Mundstück etwa in einem Winkel von 30 Grad zur Oberfläche des Operationstisches steht und fixieren Sie den Kopf des Tieres auf der Halterung. Um die Zugänglichkeit zur Cisterna magna zu verbessern, positionieren Sie den Körper des Tieres in einem Winkel von etwa 30 Grad von der Oberfläche des Tisches, wobei der Kopf nach unten geneigt ist, wodurch ein Winkel von 120 Grad zum Rest des Körpers entsteht, und verlängern Sie den Nacken, um den Zugang zur Cisterna magna zu erleichtern. Sobald das Tier richtig positioniert ist, tragen Sie eine Augensalbe auf, rasieren Sie den Nacken und desinfizieren Sie den Bereich mit Alkoholtüchern und Betadine.

Verwenden Sie eine chirurgische Schere, um einen Schnitt in der Mittellinie zu machen, der auf Höhe des Hinterhauptbeins beginnt und sich nach hinten erstreckt. Trennen Sie das oberflächliche Bindegewebe und die Nackenmuskulatur vorsichtig, indem Sie mit einer Pinzette mit feiner Spitze seitlich von der Mittellinie ziehen, wodurch die Duralmembran über der Cisterna magna freigelegt wird. Positionieren Sie einen kleinen chirurgischen Separator, um die Cisterna magna während des gesamten Eingriffs sichtbar zu machen.

Identifizieren Sie das kaudale Ende des Hinterhauptbeins und führen Sie die zuvor gebogene Nadel unmittelbar darunter ein. Sobald die Dura perforiert ist, lassen Sie die gebogene Spitze der Nadel unter die Oberfläche eindringen, indem Sie die Spritze vorsichtig nach oben und parallel zum Körper des Tieres ziehen, um eine bessere Stabilität zu gewährleisten. Injizieren Sie die Verbindung langsam, um eine Beeinträchtigung des natürlichen Flusses der Zerebrospinalflüssigkeit zu vermeiden.

Lassen Sie die Nadel nach der Injektion eine Minute lang im Inneren ruhen und entfernen Sie sie dann vorsichtig mit Hilfe einer Pinzette mit feiner Spitze.