Kanülenimplantation in die Cisterna Magna im Mausmodell

Beginnen Sie mit einer anästhesierten Maus, die in einem stereotaktischen Rahmen platziert wird, deren Kopf nach unten geneigt ist, um einen leichteren Zugang zur Cisterna magna zu ermöglichen, einem Raum, der mit Liquor (Liquor) gefüllt ist.

Ein Schnitt in der Mittellinie der Kopfhaut legt die Cisterna magna frei, die als umgekehrtes Dreieck zwischen Kleinhirn und Medulla erscheint und von der Duralmembran bedeckt ist.

Verwenden Sie ein Wattestäbchen, um überschüssige Flüssigkeit von der Dura zu entfernen.

Fassen Sie mit einer Pinzette eine Kanüle in der Nähe des Nadelabschnitts.

Führen Sie die Nadel schräg durch die Dura in die Mitte der Cisterna magna ein, um ein Eindringen in das Kleinhirn und die Medulla zu vermeiden.

Reinigen Sie ausgelaufenen Liquor.

Tragen Sie Klebstoff auf die Dura auf, um die Kanüle zu sichern, und fügen Sie dann einen Leimbeschleuniger für eine sofortige Haftung hinzu.

Decken Sie den Schnitt mit einer Mischung aus Zement und Klebstoff ab, gefolgt von einem Leimbeschleuniger.

Die intrazisternale kanülierte Maus ist bereit für die gezielte Liquorabgabe von Therapeutika.

Fixieren Sie die Maus im stereotaktischen Rahmen, indem Sie entweder den intraneuralen Bogen oder den Jochbogen verwenden. Neigen Sie dann den Kopf leicht, so dass er einen Winkel von 120 Grad zum Körper bildet.

Tragen Sie anschließend eine Augensalbe auf und tragen Sie sie bei Bedarf während der Operation erneut auf. Finde den Hinterhauptkamm, also den Teil des Schädels, der unmittelbar über die Nackenmuskulatur hinausragt. Hebe die darüber liegende Haut mit einer Pinzette an und schneide ein mandelförmiges Stück Haut von etwa einem Zentimeter entlang der Mittellinie ein.

Ziehen Sie dann mit dem Hinterhauptkamm als Referenzpunkt das oberflächliche Bindegewebe auseinander, um die darunter liegende Nackenmuskulatur freizulegen. Verwende Wattestäbchen oder Augenspieße, um die daraus resultierenden Blutungen zu kontrollieren. Um fortzufahren, trennen Sie die Muskeln an der Mittellinie, indem Sie mit der Pinzette vorsichtig in der Mitte der Inzisionsstelle in der vorderen bis hinteren Achse entlangfahren.

Verbinden Sie dann mit einer gebogenen Pinzette in jeder Hand die Spitzen in der Mitte nahe der Unterseite des Schädels und ziehen Sie die Muskeln zur Seite, um die Cisterna magna freizulegen. Die Cisterna magna sieht aus wie ein winziges umgekehrtes Dreieck, das oben vom Kleinhirn und unten von der Medulla umrandet wird. Wischen Sie mit einem chirurgischen Augenspeer oder Wattestäbchen über die Duralmembran, die das CM bedeckt. Fassen Sie dann mit einer gebogenen Pinzette in der dominanten Hand die Kanüle in der Nähe der mit dem Schlauch bedeckten Nadel an.

Legen Sie dann den Mittelfinger der anderen Hand auf die Ohrstange, um eine stabile Auflage für die Kanüle zu schaffen. Durchstechen Sie nun in der Mitte des CM die Dura in einem Winkel von 45 Grad relativ zum Mauskopf. Führen Sie die Nadel nur dort ein, wo sich die Fase unter der Dura befindet, um ein Eindringen in das Kleinhirn oder die Medulla zu vermeiden.

Reinigen Sie bei Bedarf ausgelaufenen Liquor mit einem Speer oder Tupfer. Tragen Sie dann ein paar Tropfen Cyanacrylat auf die Duralmembran auf, die die Kanüle umgibt, und fügen Sie einen Tropfen Leimbeschleuniger hinzu, um den Kleber sofort auszuhärten. Kombinieren Sie anschließend Zahnzement und Cyanacrylatkleber.

Bedecken Sie dann die gesamte Inzisionsstelle und tragen Sie schnell einen Tropfen Leimbeschleuniger auf, um auszuhärten.