JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:40 Min. • August 29th, 2025
Beginnen Sie mit fluoreszenzmarkierten, induzierten pluripotenten Stammzellen, die aus neuralen Vorläuferzellen oder NPCs gewonnen werden.
Resuspendieren Sie die Zellen in einem extrazellulären Matrix-Hydrogel, um eine einheitliche Zell-Matrix-Mischung zu erzeugen.
Die Mischung auf Eis ausbrüten.
Übertragen Sie als Nächstes ein menschliches zerebrales Organoid in eine Schale.
Entfernen Sie überschüssige Medien und stellen Sie die Schale für den Injektionsvorgang unter ein Mikroskop.
Geben Sie das Zell-Matrix-Gemisch auf einen vorgekühlten, sterilen Objektträger und aspirieren Sie es mit einer vorgekühlten Spritze.
Injizieren Sie die Mischung langsam auf die Organoidoberfläche, um die Gewebezerstörung zu minimieren.
Lassen Sie das Organoid kurz ruhen, fügen Sie dann Medien hinzu, geben Sie das Organoid in eine Multi-Well-Platte und inkubieren Sie.
Das Hydrogel verfestigt sich und verankert die NPCs an der Injektionsstelle. Verfolgen Sie die NPCs mit Hilfe der Fluoreszenzmikroskopie.
Im Laufe der Zeit vermehren sich die NPCs und wandern in entfernte Regionen des Organoids, wo sie sich in unreife und reife Neuronen differenzieren.
Dies ermöglicht eine zuverlässige Zelltransplantation mit minima
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