Bewertung von Bakterien-Wirtszell-Interaktionen mit biomimetischen Kügelchen

Nehmen Sie eine Multiwell-Platte, die eine Epithelzellkultur aus Säugetieren enthält.

Fügen Sie in den Testvertiefungen einen bakteriellen Krankheitserreger zusammen mit Polymerkügelchen hinzu, die an bakterielle Oberflächenproteine gekoppelt sind.

Geben Sie in die Kontrollvertiefungen den Erreger und die Kügelchen ohne bakterielle Oberflächenproteine. Ausbrüten.

In den Testvertiefungen ahmen die Kügelchen die Bakterienoberfläche nach und konkurrieren mit dem Erreger um die Bindung an die Phosphatidsäure der Epithelzellmembran, wodurch die Anheftung der Bakterien reduziert wird.

In den Kontrollvertiefungen beeinflussen die Kügelchen die Anheftung der Bakterien nicht.

Entfernen Sie das Medium und waschen Sie es mit Puffer, um ungebundene Bestandteile zu entfernen.

Inkubieren Sie mit einem nichtionischen Detergens, um die Zellen zu lysieren und membrangebundene Bakterien und Kügelchen freizusetzen.

Pipettieren Sie das Lysat, um eine homogene Suspension zu erzeugen, und verdünnen Sie das Homogenat seriell mit Puffer.

Übertragen Sie die Verdünnungen auf Agarplatten, inkubieren Sie, um die Koloniebildung zu ermöglichen, und zählen Sie die Kolonien.

Die Testplatte weist weniger Kolonien