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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 2:30 Min. • August 29th, 2025
Beginnen Sie mit einer Multi-Well-Platte mit vorbehandelten Makrophagen, die bakteriellen Legionella pneumophila, Vesikeln der Außenmembran (OMVs) ausgesetzt waren.
Legionella pneumophila wird in einem definierten Bakterium-Wirtszell-Verhältnis zugegeben, um die OMV-behandelten Makrophagen zu infizieren.
Während der Inkubation internalisieren die Makrophagen die Bakterien in membrangebundenen Phagosomen.
Die OMV-Vorbehandlung verändert die Makrophagen-Signalgebung und hemmt die Reifung der Phagosomen.
Dies erleichtert die Bildung einer Legionellen-haltigen Vakuole, die die Bakterien schützt und die intrazelluläre Replikation ermöglicht.
Fügen Sie ein Reinigungsmittel hinzu und inkubieren Sie, um die Makrophagen zu lysieren. Dadurch werden die intrazellulären Bakterien an das Medium abgegeben.
Streichen Sie das verdünnte Lysat auf eine mit Nährstoffen angereicherte Agarplatte.
Während der Inkubation wachsen die Bakterien und bilden sichtbare Kolonien.
Zählen Sie die Kolonien, um die koloniebildenden Einheiten (KBE) zu bestimmen, die die Anzahl lebensfähiger Bakterien darstellen.
Vergleichen Sie die KBE-Zahlen zwischen OMV-behandelten und unbehandelten Makrophagen.
Eine höhere KBE bei OMV-beha
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