Nanopartikel-vermittelte Visualisierung des endo-lysosomalen Umbaus in bakteriell infizierten Zellen

0 Aufrufe • 2:58 Min. • August 29th, 2025

Nehmen Sie einen Objektträger mit Kammer, der menschliche Epithelzellen mit fluoreszenzmarkierten Endosomen enthält.

Intrazelluläre pathogene Bakterien einführen und inkubieren, damit sie an den Zellen haften können.

Die Bakterien injizieren Proteine, die das Zytoskelett des Wirts reorganisieren und Membranvorsprünge bilden, die die Bakterien in Vakuolen internalisieren.

Diese Vakuolen verlängern die röhrenförmigen Projektionen, die mit dem endo-lysosomalen System verbunden sind, einem Netzwerk von Vesikeln und Organellen, die den intrazellulären Transport regulieren.

Diese Projektionen lenken den Vesikeltransport um und bauen das endolysosomale System um.

Waschen, um extrazelluläre Bakterien zu entfernen, dann mit einem antibiotikahaltigen Medium inkubieren, um alle verbleibenden Bakterien zu eliminieren.

Ersetzen Sie es durch ein serumfreies Bildgebungsmedium, das das Antibiotikum enthält, und fügen Sie Nanopartikel hinzu, die mit einem kontrastierenden Fluorophor markiert sind.

Inkubieren, um den Eintritt von Nanopartikeln über Endozytose und die Akkumulation in den umgebauten Vesikeln zu ermöglichen.

Waschen, um nicht internalisierte Nanopartikel zu entfernen, und dann in einem mit Ser

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