Herstellung eines einzelligen bakteriellen Inokulums

0 Aufrufe • 2:30 Min. • September 26th, 2025

Nehmen Sie eine metabolisch aktive Kultur von Mycobacterium marinum. Dies gewährleistet eine hohe bakterielle Lebensfähigkeit und einen optimalen physiologischen Zustand.

Zentrifugieren Sie die Kultur, um die Bakterien zu pelletieren.

Der überschüssige Überstand wird verworfen und das Pellet in einem frischen Medium, das ein Dispergiermittel enthält, wieder suspendiert.

Übertragen Sie die Suspension in Mikrozentrifugenröhrchen und beschallen Sie sie unter kontrollierten Bedingungen.

Die Beschallung zerstört bakterielle Aggregate und zerstreut die Zellen, was zu einer lebensfähigen Einzelzellsuspension führt.

Sammeln Sie die beschallte Suspension in einer Spritze und leiten Sie sie durch einen Membranfilter, um verbleibende Klumpen zu entfernen, um eine gleichmäßige Einzelzellpopulation zu gewährleisten.

Messen Sie mit einem Spektralphotometer die optische Dichte der Bakteriensuspension.

Verdünnen Sie die Suspension mit frischen Kryoprotektiva-haltigen Medien, um die gewünschte Bakterienkonzentration zu erreichen und gleichzeitig die Lebensfähigkeit der Zellen zu erhalten.

Aliquotieren Sie die endgültige einzellige Suspension und lagern Sie sie bei extrem niedrigen Temperaturen. Das Kryopro

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