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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 5:46 Min. • September 26th, 2025
Nehmen Sie eine mikrofluidische Platte mit einer Vertiefung mit Sporen von Streptomyces venezuelae, einem hyphenbildenden Bakterium.
Andere ausgewiesene Vertiefungen enthalten entweder nährstoffreiches oder verbrauchtes Medium.
Die Sporen stammen von einem Stamm, der fluoreszierende DivIVA- und FtsZ-Proteine exprimiert, die an Hyphenspitzen bzw. Querwänden lokalisiert sind.
Tragen Sie Immersionsöl auf die Objektivlinse eines inversen Mikroskops und auf das Bildgebungsfenster der Platte auf.
Montieren Sie die Platte auf dem Mikroskoptisch und beginnen Sie mit der Zeitrafferaufnahme.
Laden Sie die Sporen in die Kulturkammer der Platte.
Führen Sie dann das nährstoffreiche Medium ein, um die Sporenkeimung einzuleiten.
Wenn die Hyphen wachsen, sammelt sich DivIVA an den Hyphenspitzen an, während FtsZ an den Querwänden vereinzelte Ringe bildet.
Wechseln Sie als Nächstes zum verbrauchten Medium. Der Mangel an Nährstoffen in diesem Medium begünstigt die Sporulation.
In den sprießenden Hyphen verschwinden die DivIVA-Herde, und FtsZ reorganisiert sich zu einer regelmäßigen Leiter von Teilungsringen, die Sporulationssepten bilden.
Im Laufe der Zeit bestätigt das Verschwinden der FtsZ-Fluoreszenz in den
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