Bildgebung und Quantifizierung von Schwarmvermeidungsreaktionen auf Antibiotikastress bei Pseudomonas aeruginosa

Nehmen Sie eine Schwarm-Agarplatte, die die Schwarmmotilität unterstützt – eine koordinierte bakterielle Bewegung über eine halbfeste Oberfläche, die rankenartige Muster bildet.

Beimpfen Sie die Mitte der Platte mit einer Pseudomonas aeruginosa-Kultur und platzieren Sie eine Mischung aus derselben Kultur mit einem Antibiotikum an gleichmäßig verteilten Satellitenpositionen.

Decken Sie die Platte mit einem schwarz lackierten Deckel ab, um Lichtreflexionen zu minimieren.

Legen Sie die Platte auf einen Flachbettscanner in einem Inkubator, der bei optimaler Luftfeuchtigkeit gehalten wird.

Während der Inkubation beginnt sich die zentrale Population zu vermehren und zu schwärmen.

Wenn sich der Schwarm den mit Antibiotika behandelten Kolonien nähert, erkennt er Stresssignale, die von den Bakterien abgesondert werden, und leitet um, um diese Regionen zu meiden.

Der Scanner, gesteuert von einer automatisierten Software, nimmt in regelmäßigen Abständen hochauflösende Bilder auf.

Stellen Sie diese Bilder zu einem Video zusammen, um das Fortschreiten und die Vermeidung von Schwärmen im Laufe der Zeit zu visualisieren.

Quantifizieren Sie die Schwarmvermeidung, indem Sie den Abstand zwischen jeder Satel