JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Mikrobiologie
0 Aufrufe • 2:45 Min. • September 26th, 2025
Nehmen Sie mikrofluidische Chips mit Wachstums- und Medikamentenkammern, die durch ein mikromechanisches Ventil getrennt sind.
Wildtyp- und TMP-resistente mutierte E. coli-Stämme, die in Medien suspendiert sind, werden unter Druck in die Wachstumskammern geladen, in denen Trimethoprim (TMP) das getestete Antibiotikum ist.
Beladen Sie anschließend die Medikamentenkammern mit Medien, die eine geringe Konzentration an TMP enthalten, um zellulären Stress in Bakterien zu induzieren.
Betätigen Sie das mikromechanische Ventil, um die TMP-Diffusion in die Wachstumskammern zu ermöglichen und so den Eintritt von TMP in die Bakterien zu ermöglichen.
Legen Sie die Chips in den Inkubator, der auf dem inversen Mikroskoptisch montiert ist, und starten Sie die Zeitrafferaufnahme.
In Wildtyp-E. coli bindet TMP an das Enzym Dihydrofolatreduktase, wodurch die Dihydrofolatbindung verhindert und eine stressinduzierte Filamentation und eine verminderte bakterielle Vermehrung verursacht wird.
Die veränderte DHFR-Struktur des mutierten Stammes verhindert jedoch die TMP-Bindung, was eine normale Vermehrung ermöglicht.
Beobachten Sie die Zeitrafferbilder.
Wildtyp-E. coli zeigt unter TMP-Behandlung eine Filamentieru
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos