Hochdurchsatz-Identifizierung von bakterienabweisenden Polymeren mittels Microarray-Screening

Legen Sie einen sterilisierten, mit Agarose beschichteten Microarray-Objektträger mit mehreren Polymerspots in eine Multiwell-Platte. Die Agarose minimiert die unspezifische bakterielle Bindung.

Geben Sie eine gemischte Bakterienkultur in den Objektträger und inkubieren Sie ihn unter leichtem Rühren.

Bakterien sezernieren unterschiedliche Adhäsionsproteine, die an günstige Polymerflecken binden, was im Laufe der Zeit zu einer stärkeren bakteriellen Anheftung und Besiedlung führt.

Umgekehrt widerstehen abstoßende Polymere der Proteinadsorption und reduzieren die Anheftung von Bakterien.

Spülen Sie den Objektträger mit phosphatgepufferter Kochsalzlösung oder PBS, um lose gebundene Bakterien zu entfernen.

Fügen Sie DAPI hinzu, um die DNA von oberflächenhaftenden Bakterien zu färben.

Waschen Sie die Folie mit PBS, trocknen Sie sie und versiegeln Sie sie mit einem selbstklebenden Deckglas.

Sterilisieren Sie die äußere Oberfläche des Objektträgers mit Ethanol.

Nehmen Sie Hellfeldbilder auf, um die Polymerflecken zu lokalisieren. Wechseln Sie dann in den Fluoreszenzmodus, um die Fluoreszenz auf den Polymerspots zu erkennen.

Polymerflecken, die eine verminderte Fluoreszenz aufweisen, weisen auf ein