Isolierung von antibiotikaresistenten Bakterien aus einer Wasserprobe für die molekulare Analyse

0 Aufrufe • 3:16 Min. • September 26th, 2025

Beginnen Sie mit einer Wasserprobe, die Bakterien im Wasser enthält, und filtern Sie sie, um Schmutz zu entfernen.

Das verdünnte Filtrat wird auf nährstoffarme Agarplatten überführt, die jeweils mit einem spezifischen Antibiotikum ergänzt werden. Filtrat verteilen und inkubieren.

Bakterien, die ein spezifisches Antibiotikaresistenz-Gen tragen, wachsen auf den entsprechenden Antibiotikaplatten und bilden Kolonien.

Zählen Sie die Kolonien, um die koloniebildenden Einheiten (KBE) zu bestimmen, die die Anzahl der antibiotikaresistenten Bakterien darstellen.

Wählen Sie aus jeder Platte eine einzelne Kolonie aus und suspendieren Sie sie in sterilem destilliertem Wasser.

Erhitzen Sie die Suspension, um die Zellen zu lysieren und intrazelluläre Inhalte freizusetzen, einschließlich bakterieller DNA, die das Antibiotikaresistenz-Gen enthält.

Zentrifugieren Sie die Röhrchen, um die Ablagerungen zu trennen und den Überstand mit der DNA zu sammeln.

Fügen Sie der extrahierten DNA Amplifikationsreagenzien hinzu.

Legen Sie die Röhrchen in einen Thermocycler und führen Sie das Programm aus, um eine bestimmte Region der bakteriellen DNA zu amplifizieren.

Die amplifizierte DNA ist bereit für die Sequenzanalys

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