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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 4:20 Min. • September 26th, 2025
Beginnen Sie mit einer Multi-Well-Platte mit Wachstumsmedien, die mit zelluloseproduzierenden Bakterien vorgeimpft sind.
In der behandelten Vertiefung wird das Medium mit 2-Chlorethylphosphonsäure (CEPA) ergänzt.
Verschließen Sie die Platte, um einen Gasaustausch zu verhindern, und inkubieren Sie.
Während der Inkubation hydrolysiert CEPA und setzt Ethylen, ein gasförmiges Molekül, frei.
Ethylen aktiviert die bakterielle Cellulosesynthase, die zytosolische UDP-Glukose zur Synthese von Cellulose verwendet.
Im Laufe der Zeit extrudieren die Bakterien Zellulose durch ihre Membran.
Dies fördert die bakterielle Selbstorganisation an der Grenzfläche zwischen Luft und Flüssigkeit und bildet einen schwimmenden Biofilm auf Zellulosebasis (Pellikel).
Nach der Inkubation die Pellikel auf eine frische Multi-Well-Platte geben. Fügen Sie eine alkalische Lösung hinzu und inkubieren Sie bei einer höheren Temperatur, um die Zellen zu lysieren.
Entfernen Sie die alkalische Lösung. Wiederholtes Waschen unter Rühren, um Zellreste zu entfernen, während die Zellulose erhalten bleibt.
Die Pellikel trocknen und wiegen. Ein höheres Trockengewicht in den CEPA-behandelten Proben im Vergleich zur Kontrolle deutet auf e
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