Kompetenzinduzierte DNA-Aufnahme in Staphylococcus aureus
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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 3:13 Min. • September 26th, 2025
Nehmen Sie eine S. aureus-Kultur , die empfindlich auf das Antibiotikum Chloramphenicol reagiert.
Zentrifuge, um die Bakterien zu pelletieren und den Überstand zu entfernen.
Füllen Sie das Pellet in ein Röhrchen mit nährstoffbegrenzendem Medium und inkubieren Sie. Nährstoffstress erhöht die Kompetenz - die Fähigkeit des Bakteriums, fremde DNA zu internalisieren.
Erneut zentrifugieren und den Überstand entfernen. Resuspendieren Sie das Pellet in frischen nährstoffbegrenzenden Medien.
Fügen Sie als Nächstes DNA hinzu, die aus einem S. aureus-Stamm extrahiert wurde, der ein Chloramphenicol-resistentes Gen trägt. Ausbrüten.
Die DNA-Aufnahmemaschinerie verarbeitet die DNA zu einem einzigen Strang und transloziert sie in das Zytoplasma, wo sie sich in das bakterielle Chromosom integriert.
Zentrifugieren und den Überstand entfernen. Resuspendieren Sie das Pellet in nährstoffreichen Medien.
Die Suspension wird in geschmolzenen, nährstoffreichen Agar überführt, der Chloramphenicol enthält.
Die Mischung in eine Schüssel geben und inkubieren.
Das Wachstum von Chloramphenicol-resistenten Kolonien deutet auf eine erfolgreiche DNA-Aufnahme hin.
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