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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 3:27 Min. • September 26th, 2025
Beginnen Sie mit einer E. coli-Kultur , die mit einem Antibiotikum vorbehandelt ist.
Dieses Antibiotikum blockiert die Zellteilung, was zur Bildung von länglichen filamentösen Zellen mit erhöhtem DNA-Gehalt führt.
Einen Teil der Kultur auf eine nährstoffreiche Agarplatte geben und inkubieren.
Filamentöse Zellen teilen sich trotz anhaltendem Wachstum nicht; Nur nicht-filamentöse Zellen bilden Kolonien, was zu niedrigen Koloniezahlen führt.
Verdünnen Sie die restliche Bakterienkultur und fügen Sie einen fluoreszierenden DNA-bindenden Farbstoff hinzu. Dann im Dunkeln inkubieren.
Der Farbstoff dringt in die Zellen ein und bindet an die DNA.
Wirbeln Sie die Probe und leiten Sie sie dann durch ein Durchflusszytometer.
Die Menge des gestreuten Lichts von jeder Zelle entspricht ihrer Größe.
In ähnlicher Weise zeigt die von farbstoffgebundenen Nukleinsäuren emittierte Fluoreszenz den bakteriellen DNA-Gehalt an.
Mit Antibiotika behandelte Zellen zeigen eine erhöhte Streuung und Fluoreszenz, was das filamentöse Wachstum und die fortgesetzte DNA-Replikation ohne Teilung widerspiegelt.
Dies zeigt Veränderungen in der bakteriellen Physiologie, die durch zellteilungshemmende Antibiotika verursacht werden.
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