Beurteilung des Bakterienschwarms mit einer Gradientenhemmerplatte

Nehmen Sie eine Gradienten-Schwarmplatte mit doppellagigem Agar. Die untere Schicht, die einen Inhibitor enthält, wurde gegossen, um einen Gradienten des Inhibitors zu erzeugen.

Die Platte enthält isometrisch angeordnete Vertiefungen, um ausreichend Platz für Bakterienschwärme oder kollektive Migration zu bieten und Schwarmüberlappungen zu verhindern.

Beimpfen Sie die Vertiefungen mit einer Bakterienkultur und inkubieren Sie die Platte.

Bei niedrigen Inhibitorkonzentrationen koordinieren Bakterien ihre Flagellenbewegung und initiieren so eine kollektive Wanderung oder ein Schwärmen.

Bei hohen Inhibitorkonzentrationen unterdrückt der Inhibitor die Expression von Flagellen-verwandten Genen.

Dies führt zu einer eingeschränkten Bewegung der Geißel, was zu einer eingeschränkten Motilität des Schwarms führt.

Bilden Sie die Platte in regelmäßigen Abständen unter weißem Licht ab, um das Schwarmmuster einzufangen.

Passen Sie während der Aufnahme die Belichtungszeit an, um die Helligkeit der Schwärme zu erhöhen.

Ändern Sie die Schwellenwerteinstellungen, um Interferenzen mit dem Hintergrundlicht zu minimieren und den Kontrast zu erhöhen.

Speichern Sie das Bild für eine spätere Analyse der Wirkung der