Inaktivierung von Bakterien mit lichtaktiviertem Flavin-Mononukleotid

Beginnen Sie damit, ein pathogenes Bakterium in ein Röhrchen zu impfen, das ein flüssiges Medium enthält.

Inkubieren, um die Bakterienvermehrung zu fördern, und dann die Kultur in frische Röhrchen überführen.

Schleudern Sie die Zellen zu Pellets und entsorgen Sie den Überstand.

Resuspendieren Sie die Bakterienpellets in Pufferlösungen, die steigende Konzentrationen von Flavinmononukleotid (FMN), einem Photosensibilisator und einer Pufferlösung ohne FMN enthalten, um als Kontrolle zu dienen.

Mischen Sie den Röhrcheninhalt gründlich und geben Sie die Suspensionen in Glasröhrchen.

Setzen Sie die Röhren sichtbarem Licht aus, um FMN zu photoaktivieren, das mit molekularem Sauerstoff reagiert, um reaktive Sauerstoffspezies (ROS) zu erzeugen.

Die ROS schädigt bakterielle Zellbestandteile und verringert dadurch die Lebensfähigkeit der Bakterien.

Übertragen Sie die Probenaliquote auf feste Medien, verteilen Sie sie gleichmäßig und inkubieren Sie, damit überlebende lebensfähige Bakterien zu Kolonien heranwachsen können.

Quantifizieren Sie nach der Inkubation die Kolonien und berechnen Sie die prozentuale Verringerung der bakteriellen Lebensfähigkeit im Vergleich zur Kontrolle, um die dosisabhängige