Visualisierung einzelliger bakterieller Interaktionen

Beginnen Sie mit einer gläsernen Deckglasschale, die mit einer Kokultur aus fluoreszenzmarkierten beweglichen Bakterien und unmarkierten nicht-beweglichen Bakterien besiedelt ist.

Nehmen Sie die Schale, die ein mit Nährstoffen angereichertes Agarose-Pad enthält, und entfernen Sie vorsichtig die umgebende Silikonform.

Kippen Sie die Schüssel und schieben Sie sie mit einem gebogenen Spatel unter den Rand des Pads. Legen Sie es dann auf den Deckel einer Petriplatte.

Übertragen Sie das Pad mit der Unterseite nach unten in die Schale mit den Bakterienzellen, um einen gleichmäßigen Kontakt mit der Bakterienschicht zu gewährleisten.

Drücken Sie vorsichtig auf das Pad, um Luftblasen zu entfernen.

Legen Sie die benetzten Tücher um den Rand der Schüssel, um die Feuchtigkeit zu erhalten.

Verfolgen Sie unter einem inversen Mikroskop das bakterielle Verhalten über einen bestimmten Zeitraum.

Während die Bakterien wachsen, setzen die unbeweglichen Bakterien chemische Lockstoffe frei. Die beweglichen Bakterien nehmen diese Signale wahr und bewegen sich auf die unbeweglichen Bakterienkolonien zu.

Im Laufe der Zeit sammeln sich bewegliche Bakterien an und dringen in nicht-bewegliche Bakterienkolonien ein, w