Synthese von Metalloxid-Mikrokapseln unter Verwendung metallreduzierender Bakterien

Beginnen Sie damit, eine Suspension metallreduzierender Bakterien in ein Kulturmedium mit Metallionen zu impfen.

Inkubieren Sie mit Rotation, um das Wachstum zu fördern und die Aufnahme von Metallionen zu erleichtern.

Die Metallionen diffundieren in die Zellen und werden enzymatisch zu unlöslichen Metalloxiden reduziert.

Diese Oxide werden ausgeschieden und keimen in der Nähe der Bakterienmembran, wo sie sich außerhalb der Zellen zu starren Metalloxid-Mikrokapseln zusammenschließen.

Nach der Inkubation wird die Suspension mit Ultraschall beschallt, um die Bakterien von den Mikrokapseln zu dissoziieren.

Zentrifugieren Sie die Mischung, um die dichten Mikrokapseln zu pelletieren, und verwerfen Sie den Überstand.

Waschen Sie das Pellet mit Wasser und beschallen Sie es mit Ultraschall. Zentrifugieren Sie erneut, um die Bakterien von den Mikrokapseln zu trennen.

Fügen Sie als nächstes Ethanol hinzu, um die Oberflächenspannung zu verringern.

Erneut mit Ultraschall beschallen, um verbleibende Bakterien zu entfernen und die Mikrokapseln zu dispergieren.

Erneut zentrifugieren und den Überstand verwerfen.

Wiederholen Sie die Ethanolwäsche.

Verschließen Sie abschließend die Röhrchen, um das Austrocknen und Verformen der gereinigten Mikrokapseln zu verhindern.

Entnehmen Sie die Kultur, die die monoklonalen Bakterien enthält, und geben Sie 50 Mikroliter davon in jedes der zehn 50-Milliliter-Zentrifugenröhrchen, die das Natriumwolframatmedium enthalten.

Inkubieren Sie die zehn Röhrchen in einem 37 Grad Celsius heißen Inkubator für 120 Stunden. Nach der Inkubation legen Sie jede der Röhren in einen Ultraschallreaktor und beschallen die Zellen eine Stunde lang bei 20 Kilohertz mit 150 Watt.

Zentrifugieren Sie die Röhrchen und entfernen Sie dann die klare Flüssigkeit mit einer Pipette.

Fügen Sie dann Wasser hinzu und beschallen und zentrifugieren Sie die Röhrchen noch einmal.

Nach der zweiten Zentrifugation entfernen Sie die klare Flüssigkeit in den Röhrchen mit einer Pipette.

Fügen Sie dann 35 Milliliter 99,8%iges Ethanol hinzu und beschallen Sie die Proben erneut.

Spülen Sie die Mineralien ab, indem Sie sie zentrifugieren, Alkohol hinzufügen und die Probe noch einmal beschallen.

Entfernen Sie dann die klare Flüssigkeit in den Röhrchen mit einer Pipette und verschließen Sie die Röhrchen sofort, ohne die Probe auszutrocknen.