JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Mikrobiologie
0 Aufrufe • 6:37 Min. • October 30th, 2025
Beginnen Sie mit einer Mikroplatte mit Homogenaten, die aus Drosophila-Fliegen hergestellt wurden. Diese Fliegen beherbergten eine kontrollierte Population eines bestimmten Bakteriums in ihrem Darm.
Die Homogenate enthalten lysiertes Fliegengewebe und freigesetzte Darmbakterien.
Aspirieren Sie die suspendierten Bakterien und verdünnen Sie sie seriell über mehrere Mikroplatten.
Erkennen Sie kleine Volumina aus jeder Verdünnung auf Agarplatten und stellen Sie sicher, dass die Tröpfchen getrennt bleiben.
Inkubieren, damit sich Bakterien in sichtbare Kolonien vermehren können.
Nehmen Sie Bilder der Platten auf, um koloniebildende Einheiten (KBE) zu quantifizieren, die die Anzahl lebensfähiger Bakterienzellen darstellen, die in der Lage sind, einzelne Kolonien zu bilden.
Richten Sie mit Hilfe einer Bildanalysesoftware jedes Bild anhand einer Referenzlinie aus, definieren Sie eine Begrenzung und wenden Sie ein einheitliches Raster an, um es in Zählzonen zu segmentieren, die jeweils einem einzelnen Punkt entsprechen.
Passen Sie den Helligkeitsschwellenwert an, um einzelne Kolonien vom Hintergrund zu unterscheiden, und führen Sie dann die Analyse aus, um die Kolonien an jedem Punkt zu zählen und
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